KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY由Kohji Kamiya于1983年3月在加利福尼亞州千橡市成立，并于1996年搬遷至華盛頓州西雅圖。我們公司的目的是為生命科學和醫學界提供高質量的創新實驗室研究和診斷工具。 。 KAMIYA 是一家獨立的美國公司，服務于市場。

公司'批產品是蛋白激酶抑制劑，星形孢菌素及其類似物K252a。Staurosporine于1977年由Satoshi Ohmura博士發現，他是2015年諾貝爾獎獲得者。這是個商業上可獲得的星形孢菌素。如今，staurosporine是生命科學研究領域受歡迎的研究工具之一。

如今，神谷 ' 生命科學產品線包括數以千計的人類和動物的生物標志物的檢測與ELISA試劑盒在世界上大的選擇之一臨床前試驗。 神谷繼續提供各種其他生命科學研究產品，包括酶抑制劑和單克隆/多克隆抗體，用于多種領域，包括細胞凋亡，多藥耐藥，氧化/ DNA損傷和修復，骨生物學，癌癥，心臟健康，炎癥，壓力，肥胖和糖尿病。

1997年，KAMIYA推出了全系列臨床診斷和研究免疫測定產品，用于基于免疫比濁技術的脂質評估，凝血，炎癥，糖尿病，營養評估和血清蛋白測量。在K-測定法 開發的試劑用于標準化學分析儀，不需要混合，溶解或稀釋試劑或樣品，具有特殊的價值。

近，KAMIYA推出了 用于胰島素，D-二聚體，因子XIII，血漿FDP，血清/尿液FDP和總IgE測試的新型創新K-ASSAY化學分析儀試劑。

KAMIYA現在擁有美國任何公司廣泛的液體血清蛋白免疫分析試劑產品系列。我們為先進的醫院，醫療中心，臨床實驗室，臨床參考實驗室，研究機構，分銷商和診斷儀器公司提供臨床診斷試劑。

尋找KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY繼續為生命科學和醫學界提供創新和先進的實驗室研究和診斷工具

上海起發kamiyabiomedical KT-354現貨

大鼠微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗
微量白蛋白的定量測定
在大鼠生物樣品中
貨號：KT-354

Rat Microalbumin ELISA 

微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗大鼠
貨號KT-354
預期用途
大鼠微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫分析方法，用于大鼠生物樣品中微量白蛋白的定量測定。僅供研究使用。
引言
白蛋白是一種多功能蛋白，通過血流動力學、轉運和營養機制促進體內平衡。在所有哺乳動物和許多低等脊椎動物的血管內和血管外都發現了白蛋白。它是由肝臟合成的約67000道爾頓的分子。通常只有極少量的白蛋白逃過腎小球的再吸收，并被排泄到尿液中。許多隱匿性疾病可導致腎臟損害，這可能導致過量的血清蛋白，包括白蛋白，被腎臟和尿排出。
該ELISA可用于測定血清、組織提取物和其他生物流體中的白蛋白。
原則
雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗的原理如圖1所示。在本試驗中，樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗體反應。清洗去除未結合蛋白后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結合的抗-Album抗體。這種HRP結合抗體與先前結合的白蛋白形成復合物。在另一洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3'，5,5’-四甲基聯苯胺（TMB）來分析與免疫吸附劑結合的酶。結合酶的數量與被測樣品中白蛋白的濃度直接相關；因此，在450 nm處的吸收是對被測樣品中白蛋白濃度的測量。這個
從校準器建立的校準曲線中插入試樣中的白蛋白量，并對樣品稀釋進行校正。

圖1.

1.固相結合抗白蛋白抗體

2.添加校準器和樣品

3.形成白蛋白*抗白蛋白復合物

4.去除未結合的樣本蛋白質

5.添加抗alb-hrp共軛物

5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的復合物

6.去除未結合的抗ALB HRP

7.添加TMB基板

8.測定結合酶活性

組件
1。稀釋濃縮液
一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋劑的緩沖液。
2。濃縮洗滌液
一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。
三。酶抗體結合濃縮物
一小瓶含有150微升100倍濃縮親和力純化的抗大鼠白蛋白抗體，該抗體與HRP在A中結合。
穩定緩沖器。
4。TMB基質溶液
一瓶含有12毫升TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液，pH3.3。
5。停止解決方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告：避免接觸皮膚。
6。微量滴定板
12個可拆卸的8個井條，位于井架框架內。用親和力純化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校準器
一瓶含有凍干大鼠微量白蛋白校準器。
8。陽性對照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。濃度見控制證書。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀釋液的精密移液管（2μl至200μl）
•試管
•微孔板清洗機/吸氣機
•蒸餾水或去離子水
•微型板閱讀器
•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
•計時器

注意事項
1。開始分析前仔細閱讀說明。
2。此套件僅供研究使用。
三。為保證本產品的質量和可靠性，我們付出了很大的努力。但是，有可能
在這種情況下，由于干擾因素的高水平，可能會得到不尋常的結果。
4。防腐劑
陽性對照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
6。濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞抑制酶反應。
7。其他注意事項：
不要交換不同批次的套件組件。
請勿在到期日后使用套件組件。
防止試劑受到陽光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用試劑的地方吃、喝、吸煙或使用化妝品。
使用手套避免接觸試劑。
停止溶液含有稀硫酸。可能刺激眼睛和皮膚。之后用水沖洗
聯系。
試劑制備
1。稀釋濃縮液
提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:5稀釋。

2。濃縮洗滌液
提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:20。水晶
當儲存溫度較低時，濃縮物中的形成并不少見。將濃縮液加熱至
稀釋前30-35°C可溶解晶體。
三。酶抗體結合濃縮物
通過添加10微升計算每一個滴定板試紙所需的工作共軛溶液量。
酶抗體與990微升1X稀釋劑的結合物，用于測試每條測試條。混合均勻，但
輕輕地。避免起泡。
4。TMB基質溶液
可隨時使用。
5。停止解決方案
可隨時使用。
6。微量滴定板
可隨時使用。打開微量滴定袋并從袋中取出盤子。移除所有
不用于分析，放回袋中，與干燥劑一起重新密封。
7。大鼠微量白蛋白校準器
向凍干大鼠微量白蛋白校準器中加入1.0毫升蒸餾水或去離子水，輕輕攪拌至
溶解。校準器現在的濃度為200.0μg/ml（重組校準器應為
如果打算將來使用，則應重新報價并凍結）。需要立即制備大鼠微量白蛋白校準器。
使用前（見下表）。在每一步之間充分混合。避免起泡。

8。陽性對照
濃度和推薦稀釋度見控制證書。使用前，對陽性對照品進行短暫離心，使所有液體收集在小瓶底部。
儲存和穩定性
1。成套工具
套件的到期日期在外標簽上注明。建議的儲存溫度為4°C。注：大鼠微量白蛋白校準器和陽性對照品的長期儲存建議見下文。
2。稀釋劑
5x稀釋液濃縮液在有效期內保持穩定。1X工作溶液自制備之日起至少穩定一周。兩種溶液均應在4°C下儲存。
三。洗滌液
20倍洗滌液濃縮液在到期前保持穩定。1X工作溶液自制備之日起至少穩定一周。兩種溶液都可以在室溫（RT，16-25°C）或4°C下儲存。
4。酶抗體結合物
未稀釋的抗-alb-hrp結合物應在4°C下儲存，并在使用前立即稀釋。工作共軛溶液在黑暗中儲存時可穩定1小時。

5。TMB基質溶液
TMB基質溶液應在4°C下儲存，并在到期前保持穩定。
6。停止解決方案
停止溶液應在4°C下儲存，并在到期前保持穩定。
7。微量滴定板
抗鼠白蛋白涂層井在到期日前保持穩定，并應在4°C溫度下儲存在帶干燥劑包裝的密封箔袋中。
8。大鼠微量白蛋白校準器
凍干大鼠微量白蛋白校準器應在4°C下儲存或冷凍，直到重組。重組校準器應重新標定并冷凍保存。避免多次凍融循環。工作校準液應在使用前立即制備，并穩定8小時。
9。陽性對照
對于超過7天的儲存，應將其冷凍至到期日。在4°C溫度下儲存少于7天。避免多次冷凍/解凍循環。
不穩定跡象
如果測試正確，用校準溶液觀察到的結果應在預期值的20%以內。
樣本收集和處理
通過靜脈穿刺和血分離后的血液，通過離心分離收集血液。
對于血漿樣品，應將血液收集到裝有抗凝劑的容器中，然后離心分離。應注意盡量減少溶血，過度溶血會影響您的結果。立即化驗或等分樣品，并將樣品儲存在-20°C。避免重復冷凍/解凍。
對于任何可能含有病原體的樣本，必須注意防止接觸開放性傷口。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
分析方案
樣品稀釋
由于分析的高敏感性質，每個樣品在用于正常分析前應稀釋。1:500稀釋適合于大多數尿樣，而血清或血漿樣品可能需要稀釋1∶100萬。對于在校準曲線范圍之外產生結果的樣品的定量，可能需要更小或更大的稀釋度。如果不確定樣品水平，則應使用一個或兩個代表性樣品進行連續稀釋。
強烈建議運行整個板。
準備1:500稀釋的樣品，將2微升樣品轉移到998微升1X稀釋劑中。這樣可以稀釋1:500。
對于血清或血漿樣品，將血清或血漿中的2 L L轉化為1X稀釋液的1998 L。現在稀釋度為1:1000。接下來，將2微升1:1000稀釋液與1998微升1X稀釋液混合。現在稀釋1:1000000。在每個階段*混合。

程序
1。使用前將所有試劑置于室溫。
2。移液管100微升
校準器0（0.0 ng/ml）一式兩份
校準器1（6.25 ng/ml）一式兩份
校準器2（12.5 ng/ml）一式兩份
校準器3（25 ng/ml）一式兩份
校準器4（50 ng/ml）一式兩份
校準器5（100 ng/ml）一式兩份
校準器6（200 ng/ml）一式兩份
校準器7（400 ng/ml）一式兩份
三。用移液管將100微升稀釋陽性對照品（一式兩份）移入預先的孔中。

4。用移液管將100微升稀釋樣品（一式兩份）移到預先的孔中。
5。將微量滴定板在22°C（RT）下培養30（30±2）分鐘。孵育期間，將培養皿蓋好并保持水平。
6。孵育后，吸入井內的物質。
7。用適當稀釋的洗滌液將每口井注滿并抽吸。重復三次，總共洗四次。如果是手動清洗：將稀釋的清洗液*注入井內，倒置板，并將內容物倒入/搖出廢物容器。然后，在吸水紙上用力打井，去除殘留的洗滌液。重復三次，共洗四次。
8。用移液管將100微升適當稀釋的酶抗體結合物移到每個孔中。在22°C（RT）下培養30（30）
±2）分鐘。培養過程中，將培養皿蓋在黑暗中并保持水平。
9。按照步驟6和7中所述清洗和吸干井。
10。用移液管將100微升TMB基質溶液移到每個孔中。
11。在室溫下在黑暗中孵育10分鐘。
12。10分鐘后，向每個孔中添加100μl的停止溶液。
13。測定每孔含量450 nm時的吸光度。按照制造商的規格校準板讀卡器。
終反應混合物的吸光度可在添加停止溶液后2小時內測量。然而，良好的實驗室實踐要求盡快進行測量。
結果
1。從每個樣本的測試值中減去平均背景值。
2。利用為校準器觀察到的結果構建校準曲線。雖然也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合，但合適的曲線擬合是四參數物流曲線的擬合。
三。從校準曲線中插入測試樣品值。校正樣品稀釋系數，使其達到原樣品中微量白蛋白的濃度。
性能特點
根據良好的實驗室實踐，特定微量白蛋白的檢測需要精心的質量控制。各實驗室應采用常規的質量控制程序，以確定化驗間和化驗內的精密度和性能特征。
程序的限制
1。在*理解信息的情況下進行分析程序，將獲得可靠和可重復的結果。
包含在包裝說明書中，并遵守良好的實驗室慣例。
2。影響分析性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣品管的準確度、清洗技術、培養時間或溫度。